該研究旨在評估SPR 在疫苗接種者抗肺炎球菌莢膜多糖（anti-PnPs）IgG 定量方面的可靠性。研究采用快速蛋白液相色譜法（FPLC）從接種疫苗的患者血清樣本中分離總 IgG。為了研究抗 PnPs IgG 與 PCV13 之間的相互作用，進行了結(jié)合SPR 試驗。通過酶聯(lián)免疫吸附法測定的血清中抗 PnPs IgGs 水平與 SPR 信號之間存在很強的相關(guān)性。此外，還能根據(jù)患者對 PCV13 的特定 SPR 反應(yīng)譜將其正確分為 “非應(yīng)答者”、“應(yīng)答者 ”和 “高應(yīng)答者 ”三組。SPR 技術(shù)為在極短的實驗時間內(nèi)可靠地描述抗 PnPs IgG 與 PCV13 之間的相互作用提供了寶貴的工具。

實驗設(shè)計與方法

樣本選擇：研究納入了24名接種PCV13疫苗的患者，根據(jù)ELISA測定的抗肺炎球菌莢膜多糖（PnPs）IgG水平，將患者分為非應(yīng)答者、應(yīng)答者和高應(yīng)答者三組。

實驗流程：

IgG提取：使用快速蛋白液相色譜（FPLC）從血清樣本中提取總IgG。

SPR芯片準備：將PCV13通過胺化學(xué)方法固定在CM5傳感器芯片上。

SPR實驗：將不同稀釋度的IgG樣本注入SPR系統(tǒng)，監(jiān)測其與PCV13的結(jié)合情況。

實驗結(jié)果與分析

相關(guān)性分析：研究發(fā)現(xiàn)，SPR信號與ELISA測定的抗PnPs IgG水平之間存在顯著相關(guān)性（Spearman’s rho = 0.84, p = 0.001）。

分組比較：不同應(yīng)答組患者的SPR結(jié)合曲線存在顯著差異，能夠準確區(qū)分非應(yīng)答者、應(yīng)答者和高應(yīng)答者。

優(yōu)化條件：樣本稀釋度對SPR實驗結(jié)果有顯著影響，1:16稀釋度被證明為最佳條件，具有最低的非特異性結(jié)合和最佳的信噪比。

SPR技術(shù)原理與優(yōu)勢

技術(shù)原理：SPR技術(shù)基于光學(xué)現(xiàn)象，當偏振光照射到金屬（如金或銀）涂層表面時，生物分子在傳感器表面的結(jié)合會改變折射率，進而引起共振角或共振波長的變化。

優(yōu)勢概述

高靈敏度：能夠檢測納克級別的特異性IgG抗體。

快速響應(yīng)：實驗時間極短，僅需2分鐘即可完成。

成本效益：傳感器芯片可重復(fù)使用，適合大規(guī)模檢測。

討論與展望

SPR技術(shù)的優(yōu)勢：相比傳統(tǒng)ELISA方法，SPR技術(shù)具有更高的靈敏度和更短的實驗時間，且成本效益更高。

臨床應(yīng)用前景：
SPR技術(shù)有望成為評估疫苗響應(yīng)的新標準，為疫苗研發(fā)和臨床管理提供有力支持。

未來研究方向：未來研究將進一步探索SPR技術(shù)在不同疫苗和接種方案中的應(yīng)用效果，以及其在評估自然感染與疫苗接種后免疫響應(yīng)方面的差異。

結(jié)語

本研究成功展示了SPR技術(shù)在測量肺炎球菌疫苗響應(yīng)中的應(yīng)用潛力，為疫苗效果的評估提供了新視角。隨著技術(shù)的不斷發(fā)展和完善，SPR技術(shù)有望在疫苗研發(fā)和臨床管理中發(fā)揮越來越重要的作用。